MIKROSKOPIE-NEWSBLOG (12/10/2017)
MikroLive: Monochrom für mehr Schärfe
Mikroskopobjektive gibt es mit unterschiedlich aufwändiger Korrektur der chromatischen Abbildungsfehler. Die einfacheren und günstigeren Systeme haben hierbei immer mehr oder weniger ausgeprägte Farbsäume an Strukturgrenzen. Auch die Schärfedefinition bleibt hinter den teuren Spitzenobjektiven zurück. Für die klassichen Aufgabenstellungen in Ausbildung und Routine reicht die Abbildungsleistung der günstigen Systeme (z.B. Zeiss A-Plane) dennoch in jedem Fall aus – zumal die korrespondierenden Neofluare oder gar Apochromate das Mehrfache kosten und somit wirtschaftliche Gründe deren Einsatz entgegenstehen.
Allerdings ist die Abbildungsleistung „einfacher“ achromatischer Systeme sehr stark von der Wellenlänge des Lichtes abhängig und für „grünes“ Licht durchaus sehr gut. Dies nutzt man z.B. in der Phasenkontrastmikroskopie, bei der in der Regel nur die Helligkeitskontraste interessieren und Farbe als Information entbehrlich ist, durch die Verwendung eines Grünfilters aus. Die Schärfe ist dann auch bei lediglich achromatisch korrigierten Objektiven sehr gut. Für die digitale Dokumentation bedeutet dies, dass unter diesen Rahmenbedingungen auf Farbe ebenfalls verzichtet werden kann. Man erhält dann durch ein monochromes Bild, in dem das grüne Licht in Grauwerte umgewandelt wird, ein schärferes Bild. Die Detailerkennbarkeit wird so deutlich erleichtert. Hierzu verfügen die MikroLive-Kameras über einen Monochrommodus, in dem nur der grüne Farbauszug verwendet wird. Ein grünes Interferenzfilter im Strahlengang vor dem Präparat kann die Schärfe zusätzlich erhöhen. Das folgende Bild zeigt die Wirkung des Monochrommodus von MikroLive für den Phasenkontrast (links: normale Farbaufnahme / rechts: Monochrommodus).
Phasenkontrast: Objektiv Carl Zeiss A-Plan 100X/1,25 Ph3 mit C-Mount 0,5 und MikroLive USB3 6,4MP – Epithelzelle
Auch im Hellfeld kann der Monochrommodus zur Steigerung der Schärfe eingesetzt werden, wie nachfolgend am Beispiel der mikroskopischen Untersuchung von Pilzsporen gezeigt. Die verbesserte Konturenschärfe macht hier auch mikroskopische Längenmessungen einfacher und weniger anstrengend.
Hellfeld: Objektiv Carl Zeiss A-Plan 100X/1,25 mit C-Mount 0,5 und MikroLive USB3 6,4MP – Pilzsporen
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